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https://hdl.handle.net/10316/110888
Title: | Cotton gauze bandage: a support for protease immobilization for use in biomedical applications | Other Titles: | Gaze esterilizada de algodão: suporte para a imobilização de tripsina para uso em aplicações biomédicas | Authors: | Seabra, Inês José Abrantes de Oliveira Gil, Maria Helena |
Keywords: | Cotton gauze bandage; Trypsin/Immobilization; Cutaneous wound/; treatment; Gaze esterilizada de algodão; Tripsina/ imobilização; Lesões cutâneas/tratamento | Issue Date: | 2007 | Publisher: | University of Sao Paulo | Serial title, monograph or event: | Revista Brasileira de Ciencias Farmaceuticas/Brazilian Journal of Pharmaceutical Sciences | Volume: | 43 | Issue: | 4 | Abstract: | The covalent immobilization of trypsin on sterilized cotton gauze
bandage was carried out for future use as an anti-inflammatory
agent on wound dressing. The optimal immobilization conditions
were determined: the influence of pH, concentration, and volume
of the trypsin solution used in the immobilization procedure was
studied. The catalytic properties and kinetic parameters, as well
as the storage stability of the immobilized and free enzyme were
compared. Results showed that the optimal pH and temperature
for the immobilized trypsin in the hydrolysis of N-benzoyl-DLarginine
p-nitroanilide were 9.5 and 55 ºC, which were higher than
those of the free form (7.5 and 45 ºC). It was found, at 37 ºC and
pH 7.0 (approximately, the physiological conditions), that the Km
(Michaelis constant) was 3.98 μmol/mL and that Vmax (maximal
reaction rate) was 0.719 μmol/(min mg) for the immobilized
trypsin, compared to a Km of 2.46 μmol/mL and a Vmax of 2.89
μmol/(min mg) for the free trypsin. The amount of immobilized
trypsin was 6 mg/g dried support. After 30 days, no trypsin had
liberated from the support. The superior performance of the
immobilized trypsin demonstrates its potential application in
practice. Neste trabalho foi efetuada a imobilização de tripsina numa gaze esterilizada de algodão. Foram determinadas as condições ótimas de imobilização: foi estudada a influência do pH, concentração e volume da solução de tripsina usada na imobilização na hidrólise da N-benzoil-DL-arginina pnitroanilida. As propriedades catalíticas, os parâmetros cinéticos e as condições de estabilidade das enzimas livre e imobilizada foram comparadas. Os resultados mostraram que o pH e a temperatura ótimos para a tripsina imobilizada foram 9.5 e 55 ºC, respectivamente, maiores que os correspondentes da forma livre (7,5 e 45 ºC). A 37 ºC e a pH 7,0 (aproximadamente as condições fisiológicas) Km (constante de Michaelis) foi 3,98 μmol/mL e Vmax (velocidade máxima de reacção) foi 0,719 μmol/(min mg) para a tripsina imobilizada; para a tripsina livre os valores correspondentes foram 2,46 μmol/mL e 2,89 μmol/(min mg). A quantidade de enzima imobilizada foi de 6 mg/g (base seca). Após 30 dias não se verificou libertação de tripsina do suporte. O bom desempenho da tripsina imobilizada na gaze esterilizada de algodão comprova a sua potencial utilização como agente anti-inflamatório no tratamento de lesões cutâneas. |
URI: | https://hdl.handle.net/10316/110888 | ISSN: | 1516-9332 | DOI: | 10.1590/S1516-93322007000400006 | Rights: | openAccess |
Appears in Collections: | FCTUC Eng.Química - Artigos em Revistas Internacionais |
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