Lesão renal aguda em modelo murino de isquemia e reperfusão hepática sob expansão de volume plasmático

Abstract

Introdução: As manobras de controlo vascular hepático utilizadas durante cirurgia do fígado estão normalmente associadas a lesão de isquemia-reperfusão devido à interrupção temporária da perfusão do órgão. Doze a setenta por cento dos doentes submetidos a transplantação hepática têm disfunção renal aguda, possivelmente devido a lesão de isquemia-reperfusão hepática, entre outros factores. O modelo murino tem sido amplamente utilizado para estudo desta lesão. As soluções de colóides sintéticos de hidroxietilamidos têm propriedades antiinflamatórias e melhoram a microcirculação. Os hidroxietilamidos de terceira geração, nomeadamente o hidroxietilamido 130/0,4, têm melhor perfil de segurança que moléculas anteriores. Objectivos: Avaliação da lesão renal em modelo murino de lesão de isquemia-reperfusão hepática parcial normotérmica. Em segundo lugar, pretendeu-se testar o efeito do hidroxietilamido 130/0,4 nessa lesão. Métodos: O estudo decorreu de acordo com a legislação em vigor sobre experimentação animal. Distribuíram-se aleatoriamente 48 ratos Wistar do sexo masculino por quatro grupos de características idênticas (n=12x4). Em dois deles, os grupos de isquemia-reperfusão, colocou-se um clamp microvascular no pedículo vascular dos lobos hepáticos esquerdo e mediano, induzindo isquemia parcial (70%), e removeu-se o clamp 60 minutos depois (grupo 3 IR+HEA, com administração de hidroxietilamido durante a reperfusão e grupo IR, sem fluidoterapia). Os restantes grupos, de controlo, foram operados e tratados segundo o mesmo protocolo, mas sem indução de isquemia (grupos sham+HEA e sham). Após 120 minutos de reperfusão nos grupos de isquemia-reperfusão e 180 minutos de cirugia nos grupos de controlo colheu-se sangue da artéria aorta para doseamento de creatinina, ureia e alanina aminotransferase e retiraram-se amostras renais e hepáticas para análise histopatológica (score). Resultados: Como já publicado pelo nosso grupo, o modelo de lesão de isquemia-reperfusão hepática parcial normotérmica foi eficaz na produção de lesão hepática. No presente trabalho, o grupo IR teve concentrações médias de creatinina e ureia superiores ao grupo sham, além de um score histopatológico mais alto (p-value<0.05). Comparando os grupos IR+HEA e IR, o primeiro teve creatininémia (23.50 ± 10.53 vs 38.15 ± 7.08 μmol/L; p=0.002 – resultados em média ± desvio-padrão) e uremia (8.45 ± 1.55 vs 11.00 ± 1.60 mmol/L; p=0.002) significativamente inferiores, bem como um score histopatológico mais reduzido. Conclusões: O modelo de lesão de isquemia-reperfusão hepática parcial normotérmica foi eficaz na produção de lesão renal. Adicionalmente, o hidroxietilamido 130/0.4 mostrou um efeito protector na lesão renal neste contexto. São necessários novos estudos para testar as implicações clínicas da administração de hidroxietilamido 130/0,4 em cirurgia hepática

Background: Hepatic vascular control techniques employed during liver surgery are usually associated with ischemic-reperfusion injury due to temporary interruption of the organ’s blood flow. Twelve to seventy percent of patients who undergo hepatic transplantation develop acute renal dysfunction, possibly because of hepatic ischemic-reperfusion injury, among other factors. The murine model has been extensively used in the study of this injury. The synthetic colloid hydroxyethyl starch solutions show both anti-inflammatory properties and improvement in microcirculation. Third generation hydroxyethyl starches, namely hydroxyethyl starch 130/0,4, show a better safety profile than previous molecules. Objectives: Evaluation of renal injury in a murine model of partial normothermic hepatic ischemic-reperfusion injury. Secondarily, we aim to test the effect of hydroxyethyl starch 130/0,4 on kidney injury. Methods: The study was conducted according to legislation on animal experimentation. Forty-eight male Wistar rats were randomized into four groups with identical characteristics (n=12x4). In two of them, the ischemic-reperfusion injury groups, we placed a microvascular clamp in the vascular pedicle of the median and left liver lobes, inducing hepatic ischemia (70%), and removed the clamp 60 minutes later (IRI+HES group, with HES administration during reperfusion and IRI group, without fluid therapy). The remaining groups (controls) were sham-operated without hepatic ischemia and treated likewise (sham+HES and sham groups). After 120 minutes of reperfusion in the ischemic-reperfusion injury groups and 180 minutes in the controls we drew blood from the aorta artery for creatinine, urea and alanine aminotransferase quantification and removed kidney and liver samples for histopathological analysis (score). 5 Results: As already published by our group, the partial normothermic hepatic ischemicreperfusion injury model was effective in producing liver injury. In the present work, we found that the IRI group had higher creatinine and urea concentrations than sham, in combination with a superior severity score (p-value<0.05). When comparing IRI+HES and IRI groups, the former had significantly lower creatinine (23.50 ± 10.53 vs 38.15 ± 7.08 μmol/L; p=0.002 – results in means ± standard deviation) and urea (8.45 ± 1.55 vs 11.00 ± 1.60 mmol/L; p=0.002) concentrations, as well as a lower histopathological score. Conclusion: The partial normothermic hepatic ischemic-reperfusion injury murine model was effective in producing kidney injury. Moreover, hydroxyethyl starch 130/0,4 showed a protective effect against renal lesion in this context. Further studies are necessary to test clinical implications of hydroxyethyl starch 130/0,4 administration in liver surgery